细菌基因组完成图真菌基因组完成图微生物群落多样性宏基因组测序服务全长转录组测序第三代测序服务非靶向代谢组学靶向代谢组学脂质组学离子组学脂肪酸检测氨基酸检测代谢组学服务定量蛋白质组服务双向电泳服务修饰蛋白质组蛋白质芯片蛋白质谱鉴定蛋白互作检测Western Blot蛋白质组学服务高通量测序数据分析蛋白质组学数据分析代谢组学数据分析芯片数据分析GO/Pathway富集分析相关性和聚类分析共表达网络图靶基因预测调控网络图蛋白相互作用网络图生物信息学服务CRISPR/Cas9载体构建稳定细胞系构建服务模式生物制备服务CRISPR/Cas9技术服务甲基化测序服务甲基化芯片服务甲基化验证服务DNA甲基化服务lncRNA测序服务lncRNA芯片服务lncRNA定量PCR验证lncRNA过表达服务lncRNA抑制服务lncRNA技术服务miRNA测序服务miRNA芯片服务miRNA定量PCR验证miRNA过表达服务miRNA抑制服务miRNA靶基因验证服务miRNA技术服务环状RNA测序服务环状RNA芯片服务环状RNA定量PCR验证环状RNA过表达服务环状RNA抑制服务环状RNA技术服务转录组测序服务表达谱测序服务mRNA/lncRNA/环状RNA 三合一芯片表达谱芯片服务荧光定量PCR验证mRNA过表达服务mRNA抑制服务mRNA技术服务转录因子筛选服务抗体制备服务ChiP-Seq测序服务ChiP-qPCR技术服务EMSA技术服务luciferase 实验服务转录因子技术服务mRNA定量PCR检测miRNA定量PCR检测lncRNA定量PCR检测环状RNA定量PCR检测DNA拷贝数检测相对定量PCR服务绝对定量PCR服务荧光定量PCR服务整体课题服务SNP分型检测服务SSR/STR技术服务病毒包装服务CRISPR/Cas9技术试剂miRNA功能研究试剂lncRNA功能研究试剂环状RNA功能研究试剂mRNA功能研究试剂发表文献样品准备服务流程基金申请
Western Blot服务
服务详情

服务简介

    Western Blot中文一般称为蛋白质印迹。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品提出的蛋白进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。

     Western Blot与Southern印迹杂交Northern印迹杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过SDS-page电泳分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素膜NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与同位素记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

服务内容

1、常规SDS-PAGE Western,即1D-Western blot,就是以上介绍的最常用的Western blot

2、双向电泳Western,即2D-Western blot,这是SDS-page Western的升级方法,将蛋白样品经过2D(双向电泳)分离后,再利用特异抗体进行Western blot。可探索某个抗体能识别哪些蛋白抗原;可考察某个抗体的特异性是否良好;可检测某种特定修饰状态的蛋白的表达水平。

3、IP 或Co-IP Western blot,免疫沉淀(IP)或免疫共沉淀(Co-IP)和Western blot结合是研究蛋白相互作用或蛋白复合物的有力工具。若想鉴定某种蛋白是否和A蛋白相互作用,则可以利用A蛋白的特异蛋白进行免疫共沉淀(Co-IP),将所有与A蛋白相互作用的蛋白混合物富集下来,再混合物进行SDS-page Western,即可验证。


服务结果

A、Western blot 检测的试剂耗材、仪器设备、操作过程。

B、蛋白上样浓度、上样量一份;

C、标记好的曝光胶片、胶片扫描图;

D、各条带灰度分析报告

结果示例

1、SDS-PAGE图片

2、SDS-PAGE Western Blot图片

3、2D-Western blot图片

样品要求

A、对于常规Western blot检测,组织100mg以上、细胞数量10的6次方以上,新鲜或冷冻保存;

  B、对于2D Western blot检测,咨询业务员;