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简介 CRISPR/Cas9是最新的利用一段小RNA来识别并剪切DNA的靶向基因操作技术,多篇文章已经证明该技术可以高效进行细胞、动物、植物、酵母的靶向基因敲除和定点编辑。CRISPR/Cas9技术被Science杂志列为2013年度十大科学突破之一,2015年再次荣登Science十大科学突破之首,受到人们的高度重视。 CRISPR/Cas9技术特点 1、可实现对靶基因多个位点或多个基因同时敲除/敲入; 2、实验周期短,价格低; 3、可应用于大、小鼠、斑马鱼等,无物种限制。 一、CRISPR/Cas9快速构建试剂盒 载体特点 1、单个质粒同时表达Cas 9和gRNA; 2、优化的连接接头,无需酶切连接,阳性克隆率高达95%; 3、快速、方便、经济,只需5分钟即可进行转化; 4、多种载体可供选择,分别适用于动物、植物及难转染细胞,包括有哺乳动物/细胞、鸟类(家禽)/细胞、昆虫、单子叶植物、双子叶植物等专用载体。 试剂盒价格:2250元/5T,或3880元/10T。 试剂盒使用方法 载体种类 1、YX1-04:哺乳动物/细胞-Cas9/gRNA表达载体;红色荧光和抗性筛选标记 2、YX5-08:适用于双子叶植物,卡那霉素抗性 3、YX5-09:适用于单子叶植物,卡那霉素抗性 4、YX1-08:鸟类(家禽)/细胞-Cas9/gRNA表达载体;绿色荧光和抗性筛选标记 5、YX1-10:适用于昆虫细胞内表达cas9和gRNA,Zeocin抗性 二、Cas9体外酶切法检测gRNA靶点效率试剂盒 利用CRISPR技术进行基因敲除和编辑操作实验前,获得剪切活性高的gRNA靶点是实验成功的关键。Cas9/gRNA剪切活性与gRNA靶点的识别序列有关,每个gRNA的剪切活性都会不同。通常对一个基因设计多个gRNA靶点。本试剂盒通过Cas9/gRNA体外酶切靶点DNA片段,进行gRNA靶点活性的评估。 使用方法: 1、客户需以目标基因的基因组 DNA 为模板,PCR 扩增出带有 gRNA 靶点的DNA 片段; 2、用试剂盒体外转录gRNA, 3、用试剂盒的Cas9酶和gRNA进行酶切DNA 片段,电泳检测。 试剂盒价格:980元/5T,或2580元/30T。 结果示例: 三、Cas9质粒和mRNA等试剂 1、Cas9质粒:CAG或CMV启动子,用于细胞转染,以及体外转录出Cas9 mRNA,直接显微注射动物受精卵。价格为1200元。 2、Cas9 mRNA:可直接用于显微注射动物受精卵,价格为1880元/20μg或2580元/40μg。 3、gRNA:价格为1680元/10μg,2380元/20μg。 4、Cas 9核酸内切酶:在gRNA的引导下,对带有gRNA靶点的双链DNA进行酶切。价格为800元/20U或3200元/100U。 5、T7 核酸内切酶 I:应用于基因突变和SNP的检测,可应用于TALEN、CRISPR/CAS9形成的突变体检测。价格500元/300U或2200元/1500U。 6、T7体外转录试剂盒:价格1288元/30T。DNA转染试剂 Poly-Fecter,价格为1000元/1ml。特别适合于各种贴壁细胞的转染,对大多数贴壁细胞具有优秀的转染效率,也可以转染原代细胞和悬浮细胞。 |