转录因子的DNA结合域和顺式因子实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。萤光素酶报告基因实验(luciferase Assay)是检测这类转录因子和其靶启动子中的特异顺序结合的重要手段，其原理简述如下：
(1) 用靶启动子的特定片段替换报告基因质粒(如pGL3-basic)的启动子区；
(2) 将要检测的转录因子表达质粒与报告基因质粒共转。如果该转录因子能够激活靶启动子，则萤光素酶就会表达，且其表达量与转录因子的作用强度成正比；
(3) 加入特定的底物，萤光素酶与底物反应，产生萤光素，检测荧光的强度可以对萤光素酶的活性定量，进而判断该转录因子能否与靶启动子片段发生作用及其作用强度。
服务内容
1、分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。
2、构建含调控元件序列的荧光素梅报告基因载体。
3、筛选阳性克隆，测序。
4、扩增转录因子质粒，提纯备用。同时准备相应的空载质粒对照，提纯备用。
5、培养目的细胞，并接种于孔板中，使生长达到80%汇合度。
6、将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞。
7、提取蛋白并用于荧光素酶检测。
8、加入底物，测定荧光素酶的活性。
9、计算相对荧光强度，并与空载对照比较。
10、实验报告。
客户只需提供转录因子和启动子名称或序列，我们提供整套实验服务和结果报告。
